Recibido: 12-mar-2015                    Aceptado: 26-feb-2016

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RESUMEN

La leptospirosis bovina es una enfermedad caracterizada por ser altamente infecciosa, de distribución mundial, responsable de grandes pérdidas económicas en hatos de producción de leche; se encuentra relacionada con la presentación de abortos, muerte fetal, nacimiento de crías débiles, disminución de la producción de leche y disminución en la fertilidad. Se ha reportado, que los serovares más frecuentes en ganado bovino son L. hardjo-prajitno (serovar predominante), seguido por L. icterohaemorrhagiae, L. pomona, L. canicola, L. grippotyphosa. El objetivo de la investigación fue determinar la seroprevalencia de anticuerpos contra Leptospira sppen hembras bovinas de fincas lecheras del municipio de Pasto, Nariño. Se tomó muestras de sangre de los bovinos muestreados y fueron analizadas mediante la prueba de micro aglutinación microscópica (MAT) para determinar la seropositividad de leptospira. De igual manera, se realizó una encuesta para determinar variables consideradas factores de riesgo, como son raza, edad y factores medioambientales. La prevalencia encontrada en el municipio de Pasto, para anticuerpos de Leptospira spp. fue de 5,82%, siendo L. hardjo el serovar con más prevalencia (2,19%). Se concluye que la prevalencia de Leptospira spp, en hatos lecheros del municipio de Pasto es baja y no existe una relación de los factores de riesgo evaluados con la enfermedad en esta zona de Colombia.

Palabras clave: prevalencia, aglutinación, serovar 

ABSTRACT

Bovine Leptospirosis is a disease characterized by being highly infectious, worldwide distribution, and responsible for great economic losses in herds of milk production; it is also related to the presence of abortions, stillbirth, birth of weak calves, decreased milk production, and decreased fertility. It has been reported that the most common serovar in cattle are L. prajitno- hardjo (predominant serovar), followed by L. icterohaemorrhagiae, L. pomona, L. canicola, L. grippotyphosa. The aim of the research was to determine the seroprevalence of Leptospira spp in bovine females of dairy farms in the municipality of Pasto, Nariño. Blood samples were taken from cattle sampled and analyzed by micro microscopic agglutination test (MAT) in order to determine the HIV status of leptospira. In the same way, a survey to determine variables, considered risk factors such as race, age, and environmental factors was performed. The prevalence found in the city of Pasto for Leptospira spp antibodies was 5.82%, being the serovar L. hardjo the most prevalent one 2.19%. We conclude that the prevalence of Leptospira spp in dairy herds of the municipality of Pasto is low and there is no relationship of risk factors evaluated with the disease in this region of ​​Colombia.

Keywords: prevalence, agglutination, serovar

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INTRODUCCIÓN

El estudio se realizó en fincas lecheras del municipio de Pasto, departamento de Nariño, Colombia. La zona se encuentra ubicada a 01° 13’ 16’’ de latitud Norte y 77° 17’ 2’’ de longitud Oeste de Greenwich. Tiene una altitud de 2527 msnm, con temperatura promedio de 13,3°C, precipitación anual de 700 mm y humedad relativa del 60 a 88%. La zona se clasifica como bosque seco montano bajo, según la clasificación Holdrige ^[9].
Para seleccionar los animales se tuvo en cuenta las vacas de fincas con mediana producción, sin antecedentes de vacunación contra síndrome reproductivo y mayores de 24 meses. La muestra fue seleccionada mediante un muestreo aleatorio simple, utilizando fórmula que se indica a continuación:

Donde:
n = tamaño de muestra requerido
p = prevalencia esperada
e = error máximo aceptado
Z = nivel de confianza
N = tamaño de la población

Los parámetros de la formula utilizados fueron: prevalencia esperada 30%, error aceptado del 10% y un nivel de confianza del 95% ^[10], con lo cual se estimó una muestra de 283 animales.
Para determinar la frecuencia de presentación de leptospirosis y los títulos de anticuerpos frente a diferentes serovares, se recolectaron muestras de sangre venosa. De cada animal se obtuvo 5 ml de sangre, colectada en tubos estériles sin anticoagulante; se separó el suero y posteriormente se analizó mediante MAT, para lo cual se utilizó como antígeno los siguientes serovares y cepas: canicola, grippotyphosa (Moskva), icterohaemorrhagiae (RGA), hardjo (Hardjo bovis A) y pomona (Pomona). Se realizó una primera fase de descarte de negativos (screening), y una segunda fase que consistió en titular todos los sueros positivos al screening, a títulos de 1:100, 1:200, 1:400, 1:800, 1:1.600.
Para realizar el análisis estadístico se utilizó los paquetes estadísticos computacionales Epi Info 2002 y SAS versión 9.1. Los resultados de la frecuencia de leptospirosis se expresaron como proporciones. Para determinar la asociación entre posibles factores de riesgo y la aparición de leptospirosis se utilizó un análisis de regresión logística, acompañado de su odds (OR), con significancia del 95%. El estudio evaluó las variables: edad, sistema de apareamiento, procedencia del agua de bebida, drenaje en los potreros, consecución de remplazos y raza.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

En el presente estudio se encontró prevalencias de 0,7, 1,8, 0,4, 2,2 y 0,7 para L. canícola, L. grippotyphosa, L. icterohaemorragiae, L. hardjo y L. pomona, respectivamente. Los resultados observados son inferiores a los encontrados por Aricapa et al. ^[11], quienes reportan un valor mínimo en L. grippotyphosa de 2,9%, en un rango que va hasta un valor máximo de 26,7% en L. pomona. 
En muchos trabajos de investigación, el serovar hardjo es el agente con mayor prevalencia, llegando a valores del 35% en hatos lecheros del nororiente colombiano, seguido por canicola con valores que oscilan entre 10 y 32%.
La presente investigación muestra un comportamiento similar de las cepas y serovares evaluados. Sin embargo, las prevalencias demuestran que el agente etiológico tiene una menor incidencia en la zona, con respecto a lo reportado en el país.
Esta baja incidencia, posiblemente corresponda a las condiciones medioambientales de la zona, ya que se sabe que la leptospira tiene un crecimiento adecuado en zonas tropicales húmedas y cálidas, que no son frecuentes en el municipio de Pasto. Junto a lo anterior, Aricapa et al ^[11] mencionan que la técnica MAT es más efectiva en la detección de estados agudos de la enfermedad y es menos eficiente en la detección de estados crónicos y en transición, factor que pudo influir en los resultados obtenidos.
En la Tabla 1 se observa la distribución de frecuencia por raza, para la muestra de animales evaluados.

Tabla 1.  Distribución de frecuencias para raza.

La raza Holstein es la predominante en esta zona, la cual representa más del 70% de la población evaluada; las otras razas se encuentran en menor proporción. Esto es el resultado de la predilección del ganadero para adquirir sus animales.
En la Tabla 2 es posible observar la frecuencia de presentación de las variables evaluadas, de acuerdo con el número de hatos muestreados.

Tabla 2. Distribución de frecuencias variables consideradas como factores de riesgo, tenido en cuenta el número de hatos evaluados.

Se encontró que los hatos se caracterizan por utilizar, en su mayoría, nacimientos de agua para el suministro a los animales, no tienen un sistema de drenaje en los potreros, la inseminación artificial es el principal método de reproducción, utilizando autoremplazos. También se observó que existe la presencia de animales, especialmente perros y gastos, siendo los primeros los más importantes, y no se tiene un control de roedores.
En la Tabla 3 se muestra los resultados de los factores de riesgos expresados en OR y el nivel de significancia de cada uno. Como se observa algunos niveles no fueron determinados (nd) debido a que en ellos no se presentó serología positiva, lo que no permitió realizar el respectivo análisis.
Todos los resultados presentados anteriormente, indican que no existe una relación entre las variables consideradas como factor de riesgo, ya que el valor de significancia, para todos los casos, fue superior al 0,05. Esto puede ser consecuencia de las bajas prevalencias encontradas.
En estudios realizados por Konrad et al ^[12], en Argentina, se encontró relación en el tipo de agua de bebida y el sistema de reemplazos; con mayor prevalencia en hatos que consumían agua de río y utilizaban autoreemplazo en su sistema de producción. Sin embargo, estudios realizados por Chiebao et al ^[13] no encontrar relación significativa en el tipo de agua suministrada al ganado.
De igual manera, en el mismo estudio se observó que el sistema de drenaje mostró una relación significativa como consecuencia de un aumento de humedad, que propicia las condiciones de crecimiento de Leptospira ssp. Se hubiese esperado que en presente estudio se encontrara una relación significativa con el sistema de drenaje, ya que más del 80% de los hatos no presentan este sistema.
En la investigación desarrollada por Salgado et al ^[14], se encontró que la monta natural es un factor de riesgo para adquirir Leptospira; el estudio concluyó que el mayor serovar se transmitia en hardjo seguido por pomona. De esta manera, los resultados, para el sistema de reproducción, no mostraron relación, debido al mayor porcentaje de hatos evaluados  con inseminación artificial, mientras que los otros fueron una combinación del sistema artificial y monta natural.

Tabla 3. Odds Ratio (OR) y significancia de las variables consideradas como factor de riesgo.

nd: no determinados (no existió prevalencia en estás categorías).

En diferentes partes del mundo se ha evaluado la relación entre la raza y la presencia de leptospira, pero los resultados obtenidos en el presente estudio, muestran que no constituye un factor de riesgo para la enfermedad ^[15].
Los resultados obtenidos en este trabajo responden a este argumento; la cepa no tiene una predilección como agente huésped predilecto por raza en la especie bovina, por lo cual el nivel de infección es igual para todas las razas ^[16].

CONCLUSIONES

Se concluye que la seroprevalencia de Leptospira ssp es baja en los hatos de bovinos evaluados en el municipio de Pasto, departamento de Nariño, Colombia. A nivel de factores de riesgo, no se encontró relación con las variables evaluadas, como consecuencia de una baja incidencia de la enfermedad en la zona.

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