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Artículo de investigación científica y tecnológica

Vol. 15 Núm. 2 (2013)

Comparación del cultivo “in vitro” de Toxoplasma gondii cepa RH en las líneas celulares Hep-2 y Vero

Enviado
noviembre 11, 2015
Publicado
2013-11-05

Resumen

Introducción: La toxoplasmosis es una zoonosis causada por Toxoplasma gondii, parásito intracelular obligado capaz de replicarse en todas las células nucleadas, permitiendo su aislamiento y mantenimiento en cultivo celular. Objetivo: Comparar el cultivo de Toxoplasma gondii (RH), en células Hep-2 y Vero empleadas para propagación parasitaria. Métodos: Se optimizaron las condiciones para cultivo de Toxoplasma gondii (RH), en células Vero y Hep-2; se sembraron 500.000 y 1.000.000cel./mm3 y se infectaron 1.000.000 y 2.000.000taq/mm3 respectivamente, se hizo seguimiento hasta las 120 horas para determinar invasión celular, porcentaje de rosetas, de viabilidad y rendimiento de taquizoitos. Resultados: A las 48 horas de incubación se evidenció el 90% de invasión parasitaria en las dos líneas celulares así como el mayor recuento de rosetas; a las 120 horas se obtuvieron los mayores recuentos de taquizoitos extracelulares y un mayor índice de rendimiento de 185,9 en las células Hep-2, en la concentración de 500.000cel./mm3 y 1.000.000taq/mm3. Se obtuvo una viabilidad parasitaria promedio superior al 80% para las dos líneas celulares. Conclusiones: Se obtuvo un mayor rendimiento parasitario viable en las células Hep-2 por lo que esta línea celular puede considerarse como el mejor modelo para la propagación y mantenimiento parasitario de T. gondii (RH).

Citas

1. Peña Y, Bernal R, Pavía N. Toxoplasmosis diseminada en niños. informe de dos casos). Enf Infec y Micro. 2003;23:149-54.

2. Lindsay D, Blackburn B, Dubey J. Feline toxoplasmosis and the importance of the Toxoplasma gondii oocyst. Parasitol. 1997;19:448-61.

3. Wong S, Remington J. Biology of Toxoplasma gondii. AIDS. 1993; 7:299-316.

4. Cuellar J, Hernández A, Villegas E, Gómez J. Eficiencia de cultivo in vitro de Toxoplasma gondii en las líneas celulares THP1 y Vero. Biomédica.
2012;32:461-66 doi: http://dx.doi.org/10.7705/biomedica.v32i3.485.

5. Gomes T, de Andrade Júnior H, Zevallos S, Amato-Neto V. In vitro action of antiparasitic drugs, especially artesunate, against Toxoplasma gondii. Rev Soc Bras Med Trop. 2012;45:485-90.

6. James G, Sintchenko V, Dickeson D, Gilbert Gl. Comparison of Cell Culture, Mouse Inoculation, and PCR for Detection of Toxoplasma gondii: Effects of Storage Conditions on Sensitivity. J. Clin. Microbiol. 1996;34:1572–75

7. Cooper G, Hausman R, Wrigth N. La célula. 5 ed. Madrid: Marbán Libros; 2010.

8. Freshney R. Culture of animal cells. A manual of Basic Technique. 3 ed. Glassgow: Editorial John Wiley & Sons; 2005.

9. Harmer C, Hassl A, Kreinecker S, Aspöck H. Toxoplasma gondii in vitro cultivation: economic and efficient mass production. J. Microbiol. Methods.1996;27:225-28.

10. Harmer C, Aspöck H, Hassl A. Toxoplasma gondii in vitro cultivation: easy handling long-term propagation. J. Microbiol. Methods. 1996; 27:221-23.

11. Chatterton J, Evans R, Ashburn D, Joss A, Ho-Yen D. Toxoplasma gondii in vitro culture for experimentation. J. Microbiol. Methods. 2002;51:331-35.

12. Osorio A. Ética en la investigación con modelos animales experimentales. Alternativas y las 3 RS de Russel. Una responsabilidad y un compromiso ético que nos compete a todos. Rev. Col. Bioética. 2006; 163-83.

13. Degirmenci A, Doskaya M. Ayse C, Candan Ç, Metin K, Yüksel G, et al. Toxoplasma gondii RH Ankara: Production of evolving tachyzoites using a novel cell culture method. Exp. Parasitol. 2011;128:1-8.

14. Saadatnia G, Haj Ghani H, Khoo BY, Maimunah A, Rahmah N. Optimization of Toxoplasma gondii cultivation in VERO cell line. Trop Biomed. 2010;27:125-30.

15. Gallego C, Castaño JC, Giraldo A, Ajzenberg D, Dardé ML, Gómez JE. Caracterización biológica y molecular del aislado CIBMUQ/HDC una cepa Colombiana de referencia para Toxoplasma gondii. Biomédica. 2004;24:282-90.

16. Jones-Brando L, D’Angelo J, Posner G, Yolken R. In vitro inhibition of Toxoplasma gondii by four new derivatives of artemisinin. Antimicrob Agents Chemother. 2006; 50: 4206–08. doi: 10.1128/AAC.00793-06.

17. Sivrikaya G, Bağrıaçık EÜ. Production of Toxoplasma gondii in Vero cell culture. Turkiye Parazitol Derg. 2011;35:61-4. doi: 10.5152/tpd.2011.16.

18. Canessa M, Melioli G. Enzyme Immunoassay for Evaluation of Toxoplasma gondii growth in Tissue Culture. J. Clin. Microbiol. 1984;21:88-91.

19. Russell W, Burch R. The principles of Humane Experimental Technique, London; Methuen & Co Ltda; 1959.

20. Ding J, Wu K, Tan F, Chen XG. Establishment of an in vitro tachyzoite-bradyzoite interconversion system for Toxoplasma gondii. Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao. 2010;30:668-71.

21. Evans R, Chatterton J, Ashburn D, Joss A, Ho-Yen DO. Cell-culture system for continuous production of Toxoplasma gondii tachyzoites. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 1999;18:879-84.
22. Diab M. El-Bahy M. Toxoplasma gondii: Virulence of tachyzoites in serum free media at different temperatures. Exp. Parasitol. 2008;118:75-79.

23. Bilgin M, Yıldırım T, Hökelek Balkan M. In Vitro Effects of Ivermectin and Sulphadiazine on Toxoplasma gondii. Med. J. 2013;30:19-22 doi: 10.5152/balkanmedj. 2012.098.

24. Dauci H, Ciler A, Uner A, Aksoy U, Ustun S. In vivo and in vitro effect of Clarithromycin on Toxoplasma gondii. Turk Journal Inf. 2002;17:325-28.

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